ਓਲੀਗੋ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਲਈ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਉਪਕਰਣ

1. ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ
ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਲਈ ਡੀਨੈਚਰਿੰਗ ਪੋਲੀਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।ਡੀਨੈਚਰਿੰਗ ਏਜੰਟ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 4M ਫਾਰਮਾਮਾਈਡ ਜਾਂ 7M ​​ਯੂਰੀਆ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 5-15% ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਮੇਥਾਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਦਾ ਅਨੁਪਾਤ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ 2-10% ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਬੈਂਡ ਦੀ ਸਥਿਤੀ ਨੂੰ ਅਲਟਰਾਵਾਇਲਟ ਰੋਸ਼ਨੀ ਦੇ ਕਿਰਨ ਦੇ ਅਧੀਨ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਦੀ ਜ਼ਰੂਰਤ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਟੀਚੇ ਵਾਲੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਵਾਲੀ ਜੈੱਲ ਨੂੰ ਕੱਟ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਨੂੰ ਤੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਲੀਚ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਲੀਚਿੰਗ ਘੋਲ ਨੂੰ ਕੇਂਦਰਿਤ, ਡੀਸਲਟਡ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਮਾਤਰਾ ਅਤੇ lyophilized.

2. ਡੀਐਮਟੀ-ਆਨ, ਐਚਪੀਐਲਸੀ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ
ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਡੀਐਮਟੀ-ਆਨ ਮੋਡ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰੋ, ਕੱਚੇ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਅਮੀਨੋਲਾਈਸਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਵਾਧੂ ਅਮੋਨੀਆ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਅਲਹਿਦਗੀ ਐਸੀਟੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ ਅਤੇ 10% ਟ੍ਰਾਈਥਾਈਲਾਮਾਈਨ-ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ (TEAA) ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ C18 ਕਾਲਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਇਲੂਸ਼ਨ ਪੂਰਾ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਇਸ ਨੂੰ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਡੀਐਮਟੀ ਸਮੂਹ ਨੂੰ ਟ੍ਰਾਈਫਲੂਓਰੋਸੈਟਿਕ ਐਸਿਡ ਨਾਲ ਹਟਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਨਿਰਪੱਖਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਕੁਝ ਲੂਣ ਅਤੇ ਛੋਟੇ ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਕੱਟੀ ਹੋਈ ਟਿਊਬ ਰਾਹੀਂ ਹਟਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਡੀਸਲਟ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਇਹ ਵਿਧੀ ਉੱਚ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਉਤਪਾਦ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਪਰ depurination ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵੱਲ ਧਿਆਨ ਦੇਣਾ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹੈ.

3. DMT-ਬੰਦ, HPLC ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ
ਸਿੰਥੇਸਿਸ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਡੀਐਮਟੀ-ਆਫ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਕੱਚੇ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਅਮੋਨੋਲਾਈਸਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਵਾਧੂ ਅਮੋਨੀਆ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਅਲਹਿਦਗੀ ਐਸੀਟੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ C18 ਕਾਲਮ ਅਤੇ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ 10% ਟ੍ਰਾਈਥਾਈਲਾਮਾਈਨ-ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਵਿਛੋੜੇ ਦੇ ਪੂਰਾ ਹੋਣ ਅਤੇ ਮਾਤਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਅਲੀਕੋਟਸ ਨੂੰ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਇਸ ਵਿਧੀ ਲਈ ਵੱਖ ਹੋਣ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੇ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਸਮਾਯੋਜਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਸ਼ੁੱਧ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਅਣੂ ਵੀ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।